成分：　　邻硝基酚β－D-半乳糖昔(ONPG)　　　　　　　 60mg
　　(O－Nitrophenyl－β－D－galactopyranoside)
　　0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5)　　　　　　　 10mL
　　1%蛋白胨水(PH7.5)　　　　　　　　　　　　　30mL
制法：将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm×75mm试管，每管0.5mL，用橡皮塞塞紧。
试验方法：自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种，于36±1℃培养1～3h和24h观察结果。如果β－半乳糖苷酶产生，则于1～3h变黄色，如无此酶则24h不变色。