AMAMFSAc05024  奶油  巧克力  果糖  葡萄糖  乳糖  麦牙糖  蔗糖  液相色谱法

AM-AM-FS-Ac-05024

奶油巧克力中果糖、葡萄糖、乳糖、麦牙糖和蔗糖

1.仪器和试剂
1.1 仪器
(a)液相色谱仪——带有M600OA型泵，R401型折射率检测仪或相当的仪器，及10mV记录仪。
(b)柱填充物碳水化合物柱，300×4mm(内径)。
柱子必须符合以下标准:
对果糖的容量因子=K′=（tR－to）/to≥5其中tR=果糖的保留时间=从进样到出现最大峰高的时间;to=溶剂的保留时间=从溶剂进样到出现第一个基线变形的最大峰高或溶剂峰。
分辨因子(两个谱带中心之间的距离除以平均谱带宽度=Rs=（t2－t1）/0.5（tw1+tw2），其中t1和t2分别为从进样到第二峰(萄萄糖)出现最大峰高和第一峰(果糖)出现最大峰高的时间;tw！和tw2分别为第一和第二峰的基线宽度(以时间单位计)。对果糖:葡萄糖的比率为2.0—0.5，Rs≥1.0;对于比率≥2的，Rs≥1.25。
当任一个或两个标准不符时，则换柱子。
(c)进样阀——7120LC型带有50μl环的进样器，或同类产品。
(d)辅助设备——Bransonic12型超声浴或同类仪器，用以溶剂脱气；搅拌器；溶剂纯化过滤装置。
1.2 试剂
(a)糖的标准溶液——浓度为10μg/ml。真空条件下在60℃分别干燥糖的标准物(果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦牙糖)12h。将其溶于水中并逐次稀释到浓度为10μg/ml。当日制备。
(b)流动相——CH3CN十H2O(经活性炭过滤)(80+20)。通过WhatmanGF/F0.7μm玻璃纤维漏斗过滤，使用前在超声浴上脱气。
2.试验过程
2.1.样品的制备
称量10.0g细碎的奶油巧克力，放入≥100ml的离心瓶中，并加入50ml石油醚。在大约每分钟1800转下离心约15min。倾滗去上层清液，再萃取。
用玻璃棒研碎残留物，加入100g H2O，并称重。放在85-90℃水浴上加热25min。冷却至室温，加水至原重量。在每分钟2000转下离心10min，吸取上层清液，并用0.45μm Swinney注射过滤器过滤。
2.2.测定
    用50μL进样环吸满样品溶液，注入带有流动溶剂的柱子，流动溶剂流速为1.5—2.0ml/min。将每种糖的样品的峰高或峰面积与相应的标准峰高或峰面积相比较来计算每种糖的浓度。全部都使用同种方法测定 (面积或高度)。
3.来源
AOAC 官方方法980.13第17版

相关链接：/ziliao/sort/7/2359.html