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吸附色谱法

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-06-28
吸附色谱法是指混合物随流动相通过吸附剂时,由于该吸附剂对不同物质有不同的吸附力而使混合物分离的方法。该法是最早期的一种色谱分离技术,主要应用于某些分子量不大的物质的分离提纯,个别的如羟基磷灰石也适用于生物大分子的分离提纯,应用范围比较广。
  吸附是表面的一个重要性质之一。任何两相都可以形成表面,其中某相或溶解在某相中的溶质,在该表面的密集现象称为吸附。在固体与气体之间、固体与液体之间、液体与气体之间都可以发生吸附现象。吸附过程是可逆的,被吸附物在一定条件下可以解吸出来,然后再吸附、再解吸,形成一个动态平衡。吸附色谱过程就是不断地产生吸附与解吸的矛盾统一的过程。
凡是能够将其他物质聚集到自己表面上的物质,都称为吸附剂;聚集于吸附剂表面的物质就成为吸附物。
  应用最为广泛的一种极性吸附剂,主要优点是化学惰性,具有较大的吸附量。硅胶的吸附活性取决于含水量,当含水量小于1%时活性最高,大于20%时吸附活性最低,一般采用含水量10-20%的硅胶。
  用硅胶进行色谱分离时,要提前进行活化和纯化。纯化即降低硅胶活性,实验表明,硅胶加入4-20%水后,表面活性部位被纯化,样品溶质在吸附剂上的吸附和解吸过程加快,同时传质作用得到改善,最终柱效大幅提高。活化是指在150-195℃加热硅胶,活化覆盖有第一层小分子的硅胶,提高硅胶对样品溶质的吸附能力,其缺点是导致硅胶极性上升,产生催化反应或不可逆吸附。
  此外常用的还有:1)氧化铝 分为碱性氧化铝、中性氧化铝和酸性氧化铝,其吸附活性与含水量关系很大,在一定温度下除去水分可使氧化铝活化;2)活性炭 分为粉末活性炭、颗粒活性炭和锦纶活性炭,其吸附能力在水溶液中最强,使用前一般在150℃加热4-5小时,将吸附的大部分气体除去,锦纶活性炭则在100℃以下进行。3)聚酰胺 国外称尼龙,国内称锦纶,特别适合低分子量化合物的分离,如酚、羧酸、DNP-氨基酸、醌几芳香族化合物等。4)聚苯乙烯吸附剂 5)磷酸钙 在无机吸附剂中,磷酸钙是唯一适用于生物活性高分子物质分离的吸附剂,主要用于蛋白质的色谱分离、也适用于较小分子的核酸如转运RNA。
 
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