（一）蒸汽接种法
准备：先把接种操作室打扫干净，保持潮湿清洁。准备水壶或铝锅1只，煤球炉或电炉1只，接种台1张，接种针或大镊子一把。蒸料灭菌桶：用铁皮做成比铝锅口径小一点的圆桶，桶底放铁筛架，桶内装菌袋、瓶。上边口用塑料纸或木盖封口。
操作：将煤球炉或电炉放在操作台旁，再将水壶或铝锅放在炉子上面，锅内装适量的水，接种工具先放在锅内煮沸消毒。接种时，关好门窗，洗净双手，戴上口罩。将菌种块直接通过蒸汽放入栽培种的培养料上。在蒸汽上接种，既舒服又方便，且接种质量可靠。因为蒸汽在上冒的过程中产生一股冲力，把水壶或锅上的空气排开，蒸汽不断产生，就形成锅上一片无菌区。由于菌种得到蒸汽的湿润，比在酒精灯上接的种恢复得更快，污染也少。另外蒸汽接种不使用化学药品，可避免在接种时药品对入体的毒害。
（二）代替琼脂培养基
1.绿豆粉培养基：将新鲜、干燥、不霉变的豆粉队放入锅内煮沸调团状，装入试管或三角瓶内，塞好棉塞，用 牛皮纸或报纸包扎好试管上部，成捆放于高压锅内，用12公斤／厘米2压力灭菌半小时，然后慢慢放汽，取出试管凝固成斜面即成。
2.麦粒种：将小麦粒用温水浸泡2小时，捞出放入竹筛内，4个小时烧一次清水，约24小时左右，麦粒就萌发 小芽约1厘米。这时再放火锅内煮沸半小时，取出用凉水冷却后，加入石膏、干马粪使之成散粒，然后分装试管、三角瓶、蘑菇瓶、杂酒瓶，装量按常规。塞好棉塞进行灭菌，15磅压力灭菌1小时。然后接种。 采用此法可节约大量琼脂。化学药品。
（三）于实体组织分离简易方法
在无菌环境中，直接切取菇体未形成孢子组织块，进行 培养即称简易分离技术。
方法：在第一批菇中，选取具有该品种特性的、发育正常、菌盖肥厚、朵大、无病虫害的子实体作种菇。在蒸汽上用手把子实体一分为二，用消毒过的小刀在萌盖和菌柄交界处切取一小块菌肉，移放在斜面培养基中央。分离完后标上菌种导和分离时间，然后培养。
还可将于实体菌柄与菌盖交界处的菌肉，挑一块直接放 入灭过菌的原种瓶，培养即可。这种菌种也可直接用于栽培或扩接。
（四）以菇种菇的方法
以菇种菇，就是将子实体直接当菌种栽培。方法是：把培养料按常规栽培要求拌匀后，压块，在料块表面放些子实体（子实体要干净无污染），子实体上撒一层培养料，盖上塑料纸即可。注意子实体放入后，不能重压。在20℃以下的低温培养。
（五）"U"型音提纯菌种
常规提纯银耳伴生菌——香灰菌丝，用试管培养基反复提纯，手续繁多且不易提纯，我们采用玻璃"口"型管提纯香灰菌丝，不用琼脂培养基，就可得到纯的香灰菌丝，其方法：取1—2厘米口径的玻璃"U"型管数支，装上木屑培养基，两端用塑料纸包扎严（耐高压塑料纸），灭菌后，在接种箱内，用接种针挑香灰菌丝前端白色处一点，接于"U"管一端，经培养，菌丝长至另一端后，及时挑取一点放入又一"U"型管内，这样反复进行提纯，可获得纯菌丝。
(六）几种简易母种培养基的制作
1.缺少土豆时可用米汤或小麦煮水代替
（1）米汤培养基
煮米饭时在锅中多加些水；将米汤滤在没有油污的干净容器内，取1000毫升，倒在小锅中，加热煮沸，加入琼脂20克，搅拌使之溶化，再加入葡萄糖（如无葡萄糖，加白糖亦可）20克，蛋白胨5克（没有可不加），维生素B1片（10毫克），待药物全部溶解后，趁热倒入漏斗内，分装试管，装量为试管长度的 1／4，经 15磅压力灭菌30分钟，取出；摆成斜面。平菇菌丝在米汤培养基上的生长速度比在PDA培养基上快1倍左右。
（2）小麦汁培养基
取小麦5斤；淘洗干净，置锅中，加水煮沸，煮至小麦膨胀而不裂开，中间无白心为度，过滤后取澄清液1000毫升（不足量可加清水补充），在滤液中加入琼脂20克，葡萄糖或白糖20克，制备方法同米汤培养基，过滤后的小麦粒加入0.5％碳酸粉和1.5％的石膏粉，可用于制作原种培养基，在小麦汁培养基上先后接种平菇、凤尾菇、香菇、木耳、金针菇，其长势均比在PDA培养基强。
2.缺少琼脂时可用玉米�；蛎追棺髋嘌�
（l）玉米粒培养基
将玉米颗粒用冷水泡胀，冲成绿豆粒大小碎块或将嫩玉米粒切碎，装入试管，装量为试管的 1／3～1／2，用竹筷稍压紧，然后塞上棉塞，置高压锅内，15磅压力灭菌45分钟，取出冷却后即可作为组织分离或转接菌种的培养基，将组织块或菌丝接入其中，25℃左右下培养，7～10天菌丝长满，菌丝体洁白浓密，扩接成原种，长势亦好。
（2）米饭培养基
将已滤去米汤即将入瓶的米饭分装入试管内，稍稍压紧，使米粒成形，塞上棉塞。灭菌、接种，培养同玉米粒培养基。